Déan iniúchadh ar solúbthacht na rothaithe teirmeacha i dtaighde

Is uirlisí tábhachtacha iad na rothaithe teirmeacha, ar a dtugtar meaisíní PCR freisin, i dtaighde bitheolaíochta móilíneach agus i dtaighde géineolaíochta. Úsáidtear na hionstraimí seo chun DNA agus RNA a mhéadú trí theicneolaíocht imoibriúcháin slabhrúil polaiméaráise (PCR). Mar sin féin, níl solúbthacht na rothaithe teirmeacha teoranta d'iarratais PCR. San alt seo, déanfaimid iniúchadh ar na bealaí éagsúla a úsáidtear rothairí teirmeacha i dtaighde agus a dtábhacht maidir le heolas eolaíoch a chur chun cinn.

1. Aimpliú PCR

Príomhfheidhm aciorcal teirmeachIs é atá i gceist le haimpliú PCR a dhéanamh, rud atá ríthábhachtach do éagsúlacht feidhmchlár bitheolaíochta móilíneach. Trí shamplaí DNA nó RNA a chur faoi shraith athruithe teochta, cuireann rothairí teirmeacha dínádúrú, anáil, agus síneadh snáitheanna aigéid núicléasaigh chun cinn, rud a fhágann go n -aimpliú easpónantúil ar sheichimh sprice ar leith. Tá an próiseas seo ríthábhachtach maidir le hanailís ghéiniteach, staidéir ar léiriú géine, agus gníomhairí tógálacha a bhrath.

2. PCR cainníochtúil (qpcr)

Chomh maith le PCR caighdeánach, úsáidtear rothaithe teirmeacha le haghaidh PCR cainníochtúil nó qPCR, rud a cheadaíonn cainníochtú spriocanna aigéid núicléasaigh i sampla. Trí ruaimeanna nó tóireadóirí fluaraiseacha a ionchorprú, is féidir le rothaithe teirmeacha carnadh táirgí PCR a thomhas i bhfíor -am, ag soláthar léargas luachmhar ar leibhéil léirithe géine, ualach víreasach, agus athrú géiniteach.

3. PCR trascríobh droim ar ais (RT-PCR)

Tá ról ríthábhachtach ag rothaithe teirmeacha i PCR trascríobh droim ar ais, teicníc a athraíonn RNA ina DNA comhlántach (cDNA) le haghaidh aimplithe ina dhiaidh sin. Tá an modh seo ríthábhachtach chun staidéar a dhéanamh ar léiriú géine, víris RNA, agus patrúin splicing mRNA. Tá cycler teirmeach le rialú beacht teochta ríthábhachtach do rath turgnaimh RT-PCR.

4. PCR Digiteach

Mar thoradh ar dhul chun cinn i dteicneolaíocht theirmeach, forbraíodh PCR digiteach, modh an -íogair chun cainníochtú iomlán a dhéanamh ar aigéid núicléasacha. Trí imoibriú PCR a roinnt ar na mílte micrea -fheidhmeanna aonair, is féidir le rothairí teirmeacha an tiúchan tosaigh de mhóilín sprice a chinneadh go cruinn, rud a fhágann gur uirlis luachmhar é PCR digiteach le haghaidh braite sócháin neamhchoitianta agus anailís ar athrú uimhreach.

5. Ullmhú na leabharlanna seicheamhú na chéad ghlúine

Is cuid dhílis de phróiseas ullmhúcháin na leabharlainne iad na rothaithe teirmeacha le haghaidh feidhmchlár seicheamhú na chéad ghlúine eile (NGS). Trí aimpliú PCR-bhunaithe de bhloic DNA a dhéanamh, cuireann rothairí teirmeacha ar chumas leabharlanna seicheamhaithe a thógáil ó ábhar tosaithe teoranta, rud a ligeann do thaighdeoirí anailís a dhéanamh ar ghéanóm iomlán, trascríobh, nó eipidín orgánach.

6. Innealtóireacht Próitéin agus Mutagenesis

Chomh maith le aimpliú aigéid núicléasaigh, úsáidtear rothaithe teirmeacha i staidéir innealtóireachta próitéine agus mutagenesis. Is minic a bhíonn mutagenesis atá dírithe ar an suíomh, barrfheabhsú léirithe próitéine, agus turgnaimh éabhlóidithe treoraithe ag brath ar theicnící PCR-bhunaithe, agus ar thimthriallta teirmeacha a bhfuil rialú beacht teochta agus rátaí téimh agus fuaraithe aonfhoirmeacha acu ríthábhachtach chun torthaí cruinne agus in-atáirgthe a fháil.

7. Tástáil Sábháilteachta Comhshaoil ​​agus Bia

Baintear úsáid freisin as rothaithe teirmeacha i dtástáil sábháilteachta comhshaoil ​​agus bia, go háirithe braitheadh ​​pataiginí miocróbacha, orgánaigh ghéinmhodhnaithe (GMOanna) agus pataiginí bia -iompartha. Cumasaíonn tástálacha PCR-bhunaithe ar thimthróirí teirmeacha sainaithint tapa agus sonrach ar ábhair shalaithe, ag cinntiú sábháilteacht agus cáilíocht na samplaí bia agus comhshaoil.

Go hachomair,Cyclers teirmeachaIs uirlisí fíor -riachtanach iad i dtaighde bitheolaíochta móilíneach agus i dtaighde géineolaíochta, ag soláthar réimse leathan feidhmeanna thar aimpliú PCR traidisiúnta. Fágann a solúbthacht agus a gcruinneas go bhfuil siad ríthábhachtach do thurgnaimh ó anailís ar léiriú géine go monatóireacht chomhshaoil. De réir mar a leanann an teicneolaíocht ar aghaidh, is dócha go mbeidh ról níos tábhachtaí ag rothaithe teirmeacha maidir le fionnachtain eolaíoch agus nuálaíocht a thiomáint.